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贝克曼(BECKMAN)毛细管电泳仪PA800基线不稳定故障原因排查

发布者:YX    来源:上海仰光电子科技有限公司     发布时间:2023-6-28

贝克曼(BECKMAN)毛细管电泳仪PA800基线不稳定故障原因排查

贝克曼(BECKMAN)毛细管电泳仪PA800基线不稳定故障原因排查

一、电流不稳定

波动或无电流

可能原因及处理方法:

1、毛细管中形成气泡,冲洗毛细管,升高电压以限制初始加热或对缓冲液脱气。

2、毛细管堵塞,用吸收溶液(如NaOH)冲洗毛细管,当观察200nm的在线信号时,应该看到基线上有“台阶”,如果仍然堵着,用注射器或高压气体手动冲洗。

3、毛细管断裂,更换毛细管

4、缓冲液瓶中没有缓冲液或者装错缓冲液,灌装/改变缓冲液瓶。

5、大体积进样,正常情况下分析过程中电流应该保持稳定。

二、基线不稳定

1、基线有毛刺

(1)缓冲液沉淀,采用0.2或0.45μm的滤膜过滤缓冲液。

(2)缓冲液中有微小的气泡,用超声波或真空对缓冲液进行脱气。

(3)样品沉淀验证样品组分在缓)中液中有足够的溶解度。

2、基线噪声大

(1)毛细管接口中的狭缝堵塞,用甲醇或水清洗狭缝。

(2)氘灯老化,使用DAD测试来测定氘灯的光强度和工作时间,若必要就更换新的氘灯。

(3)数据采集速率太高,确定峰宽,需要的话降低采集速率

(4)参比波长设置不合适,分析过程中采集1^光谱图,在不影响样品吸收的情况下采用尽可能低的波长,并采用宽的带宽。

(5)缓冲液在检测波长有吸收,使用UV吸收最低的缓冲液,如磷酸盐和硼酸盐特别是在低于210nm检测时。

3、基线飘移

(1)毛细管准直定位不合适,重新在检测器块中安装毛细管卡套。

(2)温度未平衡,打开顶盖之后要有10-20分钟的平衡时间。

(3)氘灯刚刚开启,开启氘灯后要有15-30分钟的平衡时间。

三、分离效率差

1、宽色谱峰

(1)样品超载,降低样品浓度或进样量。

(2)过量的焦耳热,降低电压、缓冲液电导或毛细管内径。

2、变形的色谱峰

(1)样品和缓冲液的离子淌度不匹配,调节淌度或增大缓冲液和样品的电导差异。

(2)样品超载,降低样品浓度或进样量。

3、峰拖尾

样品吸附到毛细管壁,使用聚合物添加剂或涂层毛细管。



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