
毛细管电泳仪维修-电泳峰出现异常故障排查:
一、无电泳峰
1、检查结果:没有电流。
可能原因:毛细管堵塞或断裂。
解决方案:用水冲洗毛细管,观察是否有水流出。若无水流出,拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂。若毛细管没断裂,可用水反向高压冲洗。缓冲液需过滤,将样品过滤或离心去除其中的颗粒。
2、检查结果:电流波动很大,甚至几乎消失。
可能原因:缓冲液中有气泡产生或区带中样品析出。
解决方案:将缓冲液超声脱气,如果还有此现象发生,则可能是区带中样品析出,可降低样品浓度。对于在缓冲液中溶解度不高的样品,需在缓冲液中加入添加剂。
3、检查结果:电流初始值较小,后逐渐增大。
可能原因:样品进样量过大。
解决方案:减少进样量。
4、检查结果:电流正常。
可能原因:样品浓度过低。
解决方案:使用高浓度样品测试,如果无法解决则有可能是以下其它原因。
5、检查结果:电流正常。
可能原因:检测波长设置不正确。
解决方案:确认被分析物的特征吸收,检查检测波长设置。
6、检查结果:电流正常。
可能原因:分离极性错误。
解决方案:对于蛋白质样品,注意蛋白质在分离条件下其PI和所带电荷。对于核酸样品,通常条件下会带负电荷。
7、检查结果:电流正常。
可能原因:样品在毛细管内壁吸附。
解决方案:对于蛋白质和核酸样品,应尽量采用涂层毛细管、极端pH条件或动态涂层,防止样品吸附。
8、检查结果:电流正常。
可能原因:光学检测器或光纤损坏。
解决方案:进行标准样品测试,如果没有对应结果出现,则可能存在硬件问题。
二、电泳峰拖尾
1、可能原因:毛细管窗口未开或窗口位置不正。
解决方案:打开毛细管检测窗口或调整窗口位置。
2、可能原因:样品在毛细管内壁吸附。
解决方案:对于蛋白质和核酸样品,应尽量采用涂层毛细管、极端pH 条件或动态涂层,防止样品吸附。
三、电泳峰不对称
1、可能原因:毛细管入口切口不平齐。
解决方案:重新切割毛细管入口。
2、可能原因:缓冲溶液与样品溶液电解率差别过大。
解决方案:采用缓冲液作为样品溶剂。
四、电泳峰过宽
1、检查结果:降低样品进样量,有改善。
可能原因:样品浓度太大。
解决方案:可降低样品浓度或减少进样量。
2、检查结果:降低样品进样量,无改善。
可能原因:样品本身性质不均一。
解决方案:此原因主要是针对蛋白质样品,小分子样品发生的概率较低。
五、迁移时间不稳定
1、检查结果:出峰时间不稳定且无规律。
可能原因:缓冲液与毛细管内壁平衡较慢。
解决方案:每次样品运行之间避免用NaOH冲洗毛细管。
2、检查结果:出峰时间依次后延。
可能原因:样品中物质易在毛细管内壁吸附。
解决方案:首先在每次样品运行之前用0.1N NaOH溶液短时间冲洗毛细管,观察迁移时间能否重复。如果效果不佳,使用涂层毛细管或将样品再次处理。
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